KEGG mapper:
輸入:cufdiff生成的差異基因列表(log2fold_change的絕對值>1, pvalue<0.01)
目的:在KEGG網站中,利用KEGG mapper工具進行pathway注釋。
過程:
1. ID轉換:將gene symbol轉換為uniprobID
方法:利用uniprot網站的工具。網址:https://www.uniprot.org/uploadlists/
步驟:
1)准備gene symbol列。只需這一列即可。
2)選擇“gene name” 轉換成“UniProt”。點擊submit。
3)將轉換完成的數據,進行篩選(物種:人,鼠;是否reviewed)。下載篩選后的數據。
問題:
1)該網站在我的linux系統上顯示錯誤,有很多按鈕無法顯示。只能利用其它的window系統實現轉換。
2)該網站不能對4000+個genesymbol進行轉換。我輸入2950個gene symbol后,第一次轉換失敗;第二次轉換成功。
2.KEGG pathway注釋:
方法:將uniprot ID輸入KEGG mapper的列表中(需添加color列),點擊exec。
步驟:
1)網頁的“Organism-specific”,需要輸入正確。點擊旁邊的按鈕可以查找物種的縮寫。(我在此花費了許久)。人:hsa;鼠:mmu
2)網頁的“Optional use of outside ID”,選擇UniProt。
3)點擊Exec即可。
搜索pathway的方法:
在KEGG中,搜索某個pathway的方法:https://www.kegg.jp/kegg/pathway.html
”Enter keywords “部分輸入要搜索的關鍵字,比如“hippo”;點擊Go。即得到搜索的信號通路。
KEGG有各種類型的數據庫;