同源序列比對和進化樹的繪制(轉)


轉自:果子學生信 微信公眾號

題目:結合本研究領域,利用核酸(NCBI、EMBL和DDBJ)和蛋白質(SWISSPROT)找出你感興趣的基因或蛋白質,並找出其同源的基因或者蛋白,分析它們的進化歷史

解答:

1.找出感興趣基因或蛋白的序列

2.找出其同源的基因或蛋白

3.凈化分析

如何獲取感興趣的基因(蛋白、miRNA、lncRNA等):1.移植性研究,看文獻,移花接木;2.原創性研究,前期芯片和測序的結果,篩選出差異基因;3.數據庫挖掘,找別人數據里面潛在的信息;4.合作。

本課程的示例蛋白:APOBEC3A

1.得到上一期課程中查詢得到的該蛋白質的序列

>AKE33285.1 APOBEC3A [Homo sapiens]
MEASPASGPRHLMDPHIFTSNFNNGIGRHKTYLCYEVERLDNGTSVKMDQHRGFLHNQAKNLLCGFYGRH
AELRFLDLVPSLQLDPAQIYRVTWFISWSPCFSWGCAGEVRAFLQENTHVRLRIFAARIYDYDPLYKEAL
QMLRDAGAQVSIMTYDEFKHCWDTFVDHQGCPFQPWDGLDEHSQALSGRLRAILQNQGN

2.搜索同源蛋白

1.進入NCBI,使用網頁版BLAST工具

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2.選擇功能

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3.填寫參數,運行

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4.基本解釋:從上到下依次是:基本情況、保守區域、圖形展示、比對的同源序列和得分、

5.選前30條結果,做多重比對

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6.下載保存

image

3.畫出進化樹

1.下載安裝MEGA

2.convert file to MEGAimage

3.回到主程序,打開剛保存的文件,選蛋白image

4.第一個按鈕是序列比對的結果,我們選擇image做進化樹,選第二個 neighbor joining

5.結果就出來了

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6.美化結果


附錄:

常見的建樹方法

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建樹的功能

  • 推斷基因/蛋白的功能
  • 基因/ 蛋白家族分類
  • 計算基因分化的年代


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