轉錄調控實戰 | 一文解決轉錄調控問題 | chIP-seq | ATAC-seq


做生物的想發文章怎么辦?轉錄調控來解析(huyou)!

最簡單的情形:

1. 我在研究一個非常重要的基因A,功能已經做得差不多了,現在想深挖,第一步就是想知道哪個轉錄因子調控這個基因A;

2. 我發現了一個新穎的轉錄因子B,非常想知道這個TF到底在調控哪個基因。

 

研究方法不過幾種:

1. RNA-seq分析差異基因,間接推測調控的轉錄因子。

2. 基於大量的ChIP-seq公共數據挖掘,用TF的抗體抓TF,同時抓下來TF結合的DNA,提取DNA,測序,就知道TF結合了哪些DNA,推測DNA附近的基因受該TF的調控。

3. motif分析預測,每個轉錄因子都有一個DNA結合結構域(DBD),喜歡結合在特定DNA序列上,也就是motif。去基因組上搜索motif所在的位置,其附近的基因就有可能受該TF的調控。

4. 做實驗驗證,DNase/ATAC-seq,用DNase-seq或ATAC-seq找開放區,預示着這樣的區域有調控因子結合。在開放區找motif,如果有您感興趣的TF的motif,那么這個TF很可能就在這里有結合,從而調控附近基因。

 

數據庫:

JASPAR

CistromeDB數據庫

Motif Scan

footprintDB - 非常好用,當你有一段能結合DNA的蛋白序列(NCBI上通常有),就能搜出具有類似motif的TF。

 

 

什么是motif:

motif是比較有特征的短序列,會多次出現的,一般認為它的生物學意義重大,做完CHIP-seq分析之后,一般都會尋找motif 。查找有兩種,一種是de novo的,要求的輸入文件的fasta序列,一般是根據peak的區域的坐標提取好序列 。另一種是依賴於數據庫的搜尋匹配,很多課題組會將現有的ChIP-seq數據進行整合,提供更全面,更准確的motif數據庫。

motif的定義:motif: recurring pattern. eg, sequence motif, structure motif or network motif

DNA序列如何找motif?

蛋白質序列如何找motif? 

 

待續~

 

參考:嘉因

轉錄因子調控了誰?挖全天下所有高通量實驗數據,只為您解決這一個問題 

想問一下預測motif的軟件都有哪些?軟件預測的要比已有數據庫的motif要精細很多嗎?

自學CHIP-seq分析第八講~尋找motif

研究單個基因的生物信息學分析工具(大全)

example 

 


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