在進行基因定位時，有時候需要擴增某個基因的全長，查看基因在兩個極端池中的突變位點，以及判斷基因是否為目的基因。此時，我們需要擴增出基因的全長
因此，需要在5’端UTR和3‘端UTR區域設計引物。
以甘藍為例，在TO1000數據庫網站（http://plants.ensembl.org/Brassica_oleracea/Info/Index）或者02-12數據庫網站（http://brassicadb.cn/#/）下載該基因及其前后500bp序列
TO1000：
BRAD（02-12）
在Word文檔中，用中括號[]將需要擴增的片段括起來，也就是在基因的 起始密碼子前加上[ 以及 終止密碼子后加上]
隨后，將整段序列（包括5'和3’）復制，輸入到Primer3的序列輸入框中：
接着，設計引物的Tm值和引物長度：
但是，最最最最最最最最最最重要的是，別忘了設計產物大小，如果產物大小沒有設置正確，無論如何也不會設計出引物！！！！！！！筆者的血淚教訓！！！
