cv2.error: OpenCV(4.2.0) ..\modules\imgproc\src\color.cpp:182: error: (-215:Assertion failed) !_src.empty() in function 'cv::cvtColor'

考慮到可能是視頻末尾讀取幀不正確導致的。
查看變量管理器發現，在播放時按下’q’鍵退出，控制台不會報錯，ret變量值為True；播放到末尾時，控制台報錯，ret變量值為False。
到這里問題的原因就比較明朗了——ret(return value縮寫)是一個布爾值，表示當前這一幀是否獲取正確。視頻播放到最后一幀后，程序並沒有停止讀取文件，而是繼續讀取（此時視頻文件內已經沒有數據供程序讀取了），讀不出數據，自然就報錯了。找到了問題，解決方案也就有了：讀完最后一幀以后，ret == False時跳出while循環，結束程序就行了

import cv2
cap = cv2.VideoCapture('E:/pycharm/deep_learning/output.avi')  # 精確到根目錄
while(cap.isOpened()):
    ret, frame = cap.read()
    # 第一個參數ret 為True 或者False,代表有沒有讀取到圖片
    # 第二個參數frame表示截取到一幀的圖片
    if ret == True:
        gray = cv2.cvtColor(frame, cv2.COLOR_BGR2GRAY)
        cv2.imshow('frame', gray)
    else:
        break
    if cv2.waitKey(30) & 0xFF == ord('q'):
        break
cap.release()
cv2.destroyAllWindows()