之前寫過一篇細胞類型注釋的推文:單細胞分析實錄(7): 差異表達分析/細胞類型注釋,里面介紹了細胞類型注釋的兩種思路。在談到自動注釋時,我們基本都會用SingleR這個軟件,類似的軟件還有很多,原理上可能五花八門,但表現不一定有SingleR好。很多軟件在做注釋時會基於某個細胞和參考細胞表達譜 ...
前面已經講解了: 單細胞分析實錄 : 認識Cell Hashing 單細胞分析實錄 : 使用Cell Ranger得到表達矩陣 單細胞分析實錄 : Cell Hashing數據拆分 單細胞分析實錄 : doublet檢測 單細胞分析實錄 : Seurat標准流程 單細胞分析實錄 : 去除批次效應 整合數據 這一節我們進入細胞類型注釋的學習,總的來說,兩條路線,手動注釋和軟件注釋。我在實際處理的過 ...
2021-01-07 18:43 3 3438 推薦指數:
之前寫過一篇細胞類型注釋的推文:單細胞分析實錄(7): 差異表達分析/細胞類型注釋,里面介紹了細胞類型注釋的兩種思路。在談到自動注釋時,我們基本都會用SingleR這個軟件,類似的軟件還有很多,原理上可能五花八門,但表現不一定有SingleR好。很多軟件在做注釋時會基於某個細胞和參考細胞表達譜 ...
Cell Ranger是一個“傻瓜”軟件,你只需提供原始的fastq文件,它就會返回feature-barcode表達矩陣。為啥不說是gene-cell,舉個例子,cell hashing數據得到的矩陣還有tag行,而列也不能肯定就是一個cell,可能考慮到這個才不叫gene-cell矩陣吧~它是 ...
最近Cell Systems雜志發表了一篇針對現有幾種檢測單細胞測序doublet的工具的評估文章,系統比較了常見的例如Scrublet、DoubletFinder等工具在檢測准確性、計算效率等方面的優劣,以及比較了使用不同方法去除doublet后對下游DE分析、軌跡分析的影響。 現有的檢測 ...
無論是傳統的多細胞轉錄組測序(bulk RNA-seq)還是單細胞轉錄組測序(scRNA-seq),差異表達分析(differential expression analysis)是比較兩組不同樣本基因表達異同的基本方法,可獲得一組樣本相對於另一組樣本表達顯著上調(up-regulated)和下調 ...
如果讀過一些單細胞的文獻,應該會經常看到一群名為"cycling cell"的亞群,T細胞、B細胞、上皮細胞等等在分亞群的時候,都可能碰到。實際上,這群細胞只是因為高表達一些與細胞周期相關的基因,才會被單獨聚成一群,里面可能包含多種細胞亞群的混合,只要它們處於細胞周期/增殖狀態 ...
這是一個新系列 差不多是一年以前,我定導后沒多久,接手了讀研后的第一個課題。合作方是醫院,和我對接的是一名博一的醫學生,最開始兩邊的老師很排斥常規的單細胞文章思路,即各大類細胞分群、注釋、描述,所以起初的幾個月都在摸索一條主線,再后來有主線了,要加實驗驗證,周期有點長。我這邊的分析基本做完 ...
前面我們已經學習了單細胞轉錄組分析的:使用Cell Ranger得到表達矩陣和doublet檢測,今天我們開始Seurat標准流程的學習。這一部分的內容,網上有很多帖子,基本上都是把Seurat官網PBMC的例子重復一遍,這回我換一個數據集,細胞類型更多,同時也會加入一些實際分析中很有用的技巧 ...
公眾號后台回復20210418,獲取本文的測試數據 1. 回顧 前面我已經講解了inferCNV的基本用法,這一節繼續學習:如何推斷腫瘤細胞。本文應該是到目前為止,全網最詳細的帖子(之一)。 關於腫瘤細胞的推斷,比如研究上皮細胞起源的腫瘤,我見過的一些做法如下 簡單粗暴型 ...