原文:單細胞分析實錄(2): 使用Cell Ranger得到表達矩陣

Cell Ranger是一個 傻瓜 軟件,你只需提供原始的fastq文件,它就會返回feature barcode表達矩陣。為啥不說是gene cell,舉個例子,cell hashing數據得到的矩陣還有tag行,而列也不能肯定就是一個cell,可能考慮到這個才不叫gene cell矩陣吧 它是 xgenomics提供的官方比對定量軟件,有四個子命令,我只用過cellranger count,另 ...

2020-12-28 14:12 0 1091 推薦指數:

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單細胞分析實錄(1): 認識Cell Hashing

這是一個新系列 差不多是一年以前,我定導后沒多久,接手了讀研后的第一個課題。合作方是醫院,和我對接的是一名博一的醫學生,最開始兩邊的老師很排斥常規的單細胞文章思路,即各大類細胞分群、注釋、描述,所以起初的幾個月都在摸索一條主線,再后來有主線了,要加實驗驗證,周期有點長。我這邊的分析基本做完 ...

Mon Dec 28 22:10:00 CST 2020 0 401
單細胞分析實錄(7): 差異表達分析/細胞類型注釋

前面已經講解了: 單細胞分析實錄(1): 認識Cell Hashing 單細胞分析實錄(2): 使用Cell Ranger得到表達矩陣 單細胞分析實錄(3): Cell Hashing數據拆分 單細胞分析實錄(4): doublet檢測 單細胞分析實錄(5): Seurat標准流程 單細胞 ...

Fri Jan 08 02:43:00 CST 2021 3 3438
單細胞分析實錄(16): 非負矩陣分解(NMF)檢測細胞異質性

相信做過腫瘤單細胞的小伙伴對這個分析並不陌生,如果多讀幾篇文獻,就能在CNS以及大子刊上面看到這個分析。 非負矩陣分解(Nonnegative Matrix Factorization,NMF)是在矩陣中所有元素均為非負數約束條件之下的矩陣分解方法。 基本思想:給定一個非負矩陣V, NMF ...

Sat Jun 26 04:14:00 CST 2021 0 216
單細胞分析實錄(4): doublet檢測

最近Cell Systems雜志發表了一篇針對現有幾種檢測單細胞測序doublet的工具的評估文章,系統比較了常見的例如Scrublet、DoubletFinder等工具在檢測准確性、計算效率等方面的優劣,以及比較了使用不同方法去除doublet后對下游DE分析、軌跡分析的影響。 現有的檢測 ...

Thu Dec 31 20:41:00 CST 2020 0 351
單細胞分析實錄(5): Seurat標准流程

前面我們已經學習了單細胞轉錄組分析的:使用Cell Ranger得到表達矩陣和doublet檢測,今天我們開始Seurat標准流程的學習。這一部分的內容,網上有很多帖子,基本上都是把Seurat官網PBMC的例子重復一遍,這回我換一個數據集,細胞類型更多,同時也會加入一些實際分析中很有用的技巧 ...

Wed Jan 06 07:43:00 CST 2021 1 2692
單細胞分析實錄(10): 消除細胞周期的影響

如果讀過一些單細胞的文獻,應該會經常看到一群名為"cycling cell"的亞群,T細胞、B細胞、上皮細胞等等在分亞群的時候,都可能碰到。實際上,這群細胞只是因為高表達一些與細胞周期相關的基因,才會被單獨聚成一群,里面可能包含多種細胞亞群的混合,只要它們處於細胞周期/增殖狀態 ...

Wed Mar 17 02:30:00 CST 2021 0 418
單細胞分析實錄(17): 非負矩陣分解(NMF)代碼演示

本次演示使用的數據來自2017年發表於Cell的頭頸鱗癌單細胞文章:Single-Cell Transcriptomic Analysis of Primary and Metastatic Tumor Ecosystems in Head and Neck Cancer。本次演示提供處理 ...

Sat Jul 24 01:27:00 CST 2021 0 151
單細胞分析實錄(12): 如何推斷腫瘤細胞

公眾號后台回復20210418,獲取本文的測試數據 1. 回顧 前面我已經講解了inferCNV的基本用法,這一節繼續學習:如何推斷腫瘤細胞。本文應該是到目前為止,全網最詳細的帖子(之一)。 關於腫瘤細胞的推斷,比如研究上皮細胞起源的腫瘤,我見過的一些做法如下 簡單粗暴型 ...

Mon Apr 19 06:25:00 CST 2021 0 703
 
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