之前写过一篇细胞类型注释的推文:单细胞分析实录(7): 差异表达分析/细胞类型注释,里面介绍了细胞类型注释的两种思路。在谈到自动注释时,我们基本都会用SingleR这个软件,类似的软件还有很多,原理上可能五花八门,但表现不一定有SingleR好。很多软件在做注释时会基于某个细胞和参考细胞表达谱 ...
前面已经讲解了: 单细胞分析实录 : 认识Cell Hashing 单细胞分析实录 : 使用Cell Ranger得到表达矩阵 单细胞分析实录 : Cell Hashing数据拆分 单细胞分析实录 : doublet检测 单细胞分析实录 : Seurat标准流程 单细胞分析实录 : 去除批次效应 整合数据 这一节我们进入细胞类型注释的学习,总的来说,两条路线,手动注释和软件注释。我在实际处理的过 ...
2021-01-07 18:43 3 3438 推荐指数:
之前写过一篇细胞类型注释的推文:单细胞分析实录(7): 差异表达分析/细胞类型注释,里面介绍了细胞类型注释的两种思路。在谈到自动注释时,我们基本都会用SingleR这个软件,类似的软件还有很多,原理上可能五花八门,但表现不一定有SingleR好。很多软件在做注释时会基于某个细胞和参考细胞表达谱 ...
Cell Ranger是一个“傻瓜”软件,你只需提供原始的fastq文件,它就会返回feature-barcode表达矩阵。为啥不说是gene-cell,举个例子,cell hashing数据得到的矩阵还有tag行,而列也不能肯定就是一个cell,可能考虑到这个才不叫gene-cell矩阵吧~它是 ...
最近Cell Systems杂志发表了一篇针对现有几种检测单细胞测序doublet的工具的评估文章,系统比较了常见的例如Scrublet、DoubletFinder等工具在检测准确性、计算效率等方面的优劣,以及比较了使用不同方法去除doublet后对下游DE分析、轨迹分析的影响。 现有的检测 ...
无论是传统的多细胞转录组测序(bulk RNA-seq)还是单细胞转录组测序(scRNA-seq),差异表达分析(differential expression analysis)是比较两组不同样本基因表达异同的基本方法,可获得一组样本相对于另一组样本表达显著上调(up-regulated)和下调 ...
如果读过一些单细胞的文献,应该会经常看到一群名为"cycling cell"的亚群,T细胞、B细胞、上皮细胞等等在分亚群的时候,都可能碰到。实际上,这群细胞只是因为高表达一些与细胞周期相关的基因,才会被单独聚成一群,里面可能包含多种细胞亚群的混合,只要它们处于细胞周期/增殖状态 ...
这是一个新系列 差不多是一年以前,我定导后没多久,接手了读研后的第一个课题。合作方是医院,和我对接的是一名博一的医学生,最开始两边的老师很排斥常规的单细胞文章思路,即各大类细胞分群、注释、描述,所以起初的几个月都在摸索一条主线,再后来有主线了,要加实验验证,周期有点长。我这边的分析基本做完 ...
前面我们已经学习了单细胞转录组分析的:使用Cell Ranger得到表达矩阵和doublet检测,今天我们开始Seurat标准流程的学习。这一部分的内容,网上有很多帖子,基本上都是把Seurat官网PBMC的例子重复一遍,这回我换一个数据集,细胞类型更多,同时也会加入一些实际分析中很有用的技巧 ...
公众号后台回复20210418,获取本文的测试数据 1. 回顾 前面我已经讲解了inferCNV的基本用法,这一节继续学习:如何推断肿瘤细胞。本文应该是到目前为止,全网最详细的帖子(之一)。 关于肿瘤细胞的推断,比如研究上皮细胞起源的肿瘤,我见过的一些做法如下 简单粗暴型 ...