原文:单细胞分析实录(1): 认识Cell Hashing

这是一个新系列 差不多是一年以前,我定导后没多久,接手了读研后的第一个课题。合作方是医院,和我对接的是一名博一的医学生,最开始两边的老师很排斥常规的单细胞文章思路,即各大类细胞分群 注释 描述,所以起初的几个月都在摸索一条主线,再后来有主线了,要加实验验证,周期有点长。我这边的分析基本做完。读研生活还在继续,我也不能太在意这一个课题,尽管有些时候我也很着急,尽管我在这个课题上花了很多时间。整理分析 ...

2020-12-28 14:10 0 401 推荐指数:

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单细胞分析实录(2): 使用Cell Ranger得到表达矩阵

Cell Ranger是一个“傻瓜”软件,你只需提供原始的fastq文件,它就会返回feature-barcode表达矩阵。为啥不说是gene-cell,举个例子,cell hashing数据得到的矩阵还有tag行,而列也不能肯定就是一个cell,可能考虑到这个才不叫gene-cell矩阵吧~它是 ...

Mon Dec 28 22:12:00 CST 2020 0 1091
单细胞分析实录(4): doublet检测

最近Cell Systems杂志发表了一篇针对现有几种检测单细胞测序doublet的工具的评估文章,系统比较了常见的例如Scrublet、DoubletFinder等工具在检测准确性、计算效率等方面的优劣,以及比较了使用不同方法去除doublet后对下游DE分析、轨迹分析的影响。 现有的检测 ...

Thu Dec 31 20:41:00 CST 2020 0 351
单细胞分析实录(5): Seurat标准流程

前面我们已经学习了单细胞转录组分析的:使用Cell Ranger得到表达矩阵和doublet检测,今天我们开始Seurat标准流程的学习。这一部分的内容,网上有很多帖子,基本上都是把Seurat官网PBMC的例子重复一遍,这回我换一个数据集,细胞类型更多,同时也会加入一些实际分析中很有用的技巧 ...

Wed Jan 06 07:43:00 CST 2021 1 2692
单细胞分析实录(7): 差异表达分析/细胞类型注释

前面已经讲解了: 单细胞分析实录(1): 认识Cell Hashing 单细胞分析实录(2): 使用Cell Ranger得到表达矩阵 单细胞分析实录(3): Cell Hashing数据拆分 单细胞分析实录(4): doublet检测 单细胞分析实录(5): Seurat标准流程 单细胞 ...

Fri Jan 08 02:43:00 CST 2021 3 3438
单细胞分析实录(10): 消除细胞周期的影响

如果读过一些单细胞的文献,应该会经常看到一群名为"cycling cell"的亚群,T细胞、B细胞、上皮细胞等等在分亚群的时候,都可能碰到。实际上,这群细胞只是因为高表达一些与细胞周期相关的基因,才会被单独聚成一群,里面可能包含多种细胞亚群的混合,只要它们处于细胞周期/增殖状态 ...

Wed Mar 17 02:30:00 CST 2021 0 418
单细胞分析实录(12): 如何推断肿瘤细胞

公众号后台回复20210418,获取本文的测试数据 1. 回顾 前面我已经讲解了inferCNV的基本用法,这一节继续学习:如何推断肿瘤细胞。本文应该是到目前为止,全网最详细的帖子(之一)。 关于肿瘤细胞的推断,比如研究上皮细胞起源的肿瘤,我见过的一些做法如下 简单粗暴型 ...

Mon Apr 19 06:25:00 CST 2021 0 703
单细胞分析实录(15): 基于monocle2的拟时序分析

关于什么是“拟时序分析”,可以参考本期推送的另一篇推文。这一篇直接演示代码 monocle2这个软件用得太多了,很多文章都是monocle2的图。因为只使用表达矩阵作为输入,相比于其他软件,已经很方便了。不过话说回来,我总感觉这种轨迹推断像玄学,大半的结果是调整出来的/事先已知 ...

Mon Jun 07 08:12:00 CST 2021 2 1330
单细胞分析实录(6): 去除批次效应/整合数据

上一篇已经讲解了Seurat标准流程,推文的最后,注意到了不同样本之间的表达数据是存在批次效应的,就像下图这样,有些是可以聚到一起的亚群,却出现了不同样本分开/偏移的情况,比如第3群,这种就是批次效应 ...

Thu Jan 07 03:20:00 CST 2021 0 1793
 
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